關(guān)于液氮罐復蘇樣品的方法三:
使用Nunc 凍存管,機械密封的凍存管必須密封在保護袋中。Nunc 提供CryoFlex 密封管,熱密封的聚乙烯管專門為Nunc 凍存管密封設計。將凍存管在液氮液相中凍存而沒有使用CryoFlex 密封管是十分危險的,凍存管在液氮液相中凍存必須使用CryoFlex 密封管進行熱密封。
警告:不要使用Nunc 的凍存管在液氮液相,除非正確的將凍存管密封在NuncCryoFlex Tubing (Cat. No. 343958)中。若不正確使用凍存管,液氮會進入凍存管中導致壓力上升,發(fā)生爆炸或者生物泄漏安全事故。正確使用方法可以參考NalgeNunc International Cryopreservation Manual。
當凍存管儲存在液氮液相中而沒有使用CryoFlex Tubing 時,復蘇時應將凍存管從液氮液相取出后必須在液氮氣相中儲存24h,這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸,從而降低凍存管中的壓力。等在液氮氣相儲存24h 后,將凍存管放入水浴槽,同時用毛巾覆蓋,等熔融復蘇結(jié)束后轉(zhuǎn)移凍存物。此方法也可在方法一及方法二中作為前處理使用。
整個操作過程中必須穿戴保護服,包括手套,臉罩等。
純屬個人經(jīng)驗,希望對大家有所幫助。